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卢赫的血压一下就上来了,“你吃东西就吃,你居然还不摘手套!我就搞不懂了,二楼厨房里要什么有什么,全是高端家电单价没有下一万的。就那个智能微波,干馒头都能给热软和,你怎么就这么喜欢这个专门热琼脂的破烂?”
“卢哥,你别生气嘛。我就是太饿,懒得上楼了。我下次不敢了。”对方嘴里嚼着东西含糊不清地回答。
“下次!下次!下次!你都几个下次了?上次你在微波里热鳗鱼饭,溅了一炉子的酱汁。热完也不清理,凡是进过微波的东西全被污染了,耽误了多少事?你还想有多少次?再有一次,你就给我。。。”
对方抿起嘴巴,嘴角向下,睁大眼睛抬眼盯着卢赫。眼角耷拉着,活像一只委屈的小狗。
卢赫嘴边的话被硬生生憋了回去,长叹一口气语重心长道:
“虽然你现在用的导入方式是RNP[1],但咱以后要编辑别的物种,可能还需要腺病毒[2]之类作载体的。到时候你养成习惯了,再带着手套吃东西,轻则生病重则没命。听懂了吗?实验规范每一条都不是多此一举!”
对方乖巧地点了点头,然后又把手中的饭团送到了嘴边。
卢赫已经被气到手抖了,可又不好发作。眼前这位年轻姑娘虽然头脑简单还经常冒冒失失的,但是她手稳,操作起那些爬行动物仅有几毫米的卵母细胞时,那种利索劲,让他佩服得五体投地。
于是卢赫把目光放到邻桌的电脑屏幕上试图转移注意力。可当他用那双视力5.3的眼睛瞟到屏幕上标注的一行碱基序列时,刚被压下去的火气蹭地一下又上来了。
“你又在那儿搞你的皮卡丘守宫,我都跟你说了多少次了,想要红色的很简单,但想要红脸蛋儿的很难!你知道你在干什么吗?你这是要在17472个蛋白编码基因里精准找到控制色素沉淀位置的。”
“就算找到了还没完,那种复杂的表达行为肯定是条巨长的一串碱基序列。虽然CRISPR[3]的效率高,不用麻烦你费劲设计长链,但是会很麻烦细胞的啊。你去敲这么长的链,很容易脱靶[4]的啊!”
“可是你当初编辑出全身黄化的火焰不也是成功敲了100多个碱基的长链吗?你就不能让我试试?。”
“试什么试?你是老板我是老板?就照我说的,去把睫角守宫的酪氨酸酶基因敲掉,做高系数莉莉白。做完再去找找黄色色素沉淀的位点,争取敲掉,做出高系数缺黄。这是你今年的kpi,完成了,我就给你把赛默飞的那个高通量测序平台买下来。守宫利润比龟高多了,明年你想去做皮卡丘你就去做,听懂了没?”
“可是皮卡丘更很可爱唉。你说的那俩一个惨白一个碳黑,会有人喜欢吗?”
“你别管好不好看,物以稀为贵,价格高就会有人喜欢。再让我发现你拿着我大几十万的仪器干私活,你就给我。。。”
();() “好的卢哥,我保证听话。”菜菜没等卢赫说完,就赶紧把话头堵住了,“你来看看今天刚出的电泳。”
卢赫又把嘴边的话生生咽了回去,把头探到菜菜面前的副屏跟前。只见黑色的背景上有两条短线,一条亮白色,一条暗灰色。这就意味着,脱靶很少,敲除的效率至少在70%以上。
“很好!”卢赫狂喜,“可以进行下一阶段了!咱那批睫角还有一周才能到繁殖期,给你放个假,想干什么干什么。你想做皮卡丘也可以,别耽误正事就行。”
他蹦跶着走出了细胞间,关门前还不忘嘱咐了一句:“别弄太晚,今天卖了160只,明天还得打包呢。”
卢赫小跑着回到卧室,弹跳起飞把自己摔在床上冲着天花板畅想未来。
莉莉白睫角守宫至少5000一只,敲掉酪氨酸酶基因之后大概率能得到高系数红眼的。那可是高端玩家的终极目标,卖个15000不成问题。睫角守宫一般一年多就能性成熟,喂得好可以缩短到8个月。养在恒温箱里每年能繁殖两次,一次至少4个蛋。一对一个繁殖季的利润就能到30000,养个50对利润就能和卖龟平齐了。
养这东西可比乌龟省劲儿多了,他再也不用每天提着个水泵上一楼的塘子里去换臭水了。火焰龟,能吃能拉能打架。自从开始批量养殖,他一天安稳日子都没过过,要么劝架、要么分池、要么治伤。繁殖期时还得天天举着个手电筒照蛋,把胎停的给拣出去。
他的手本来是和楼下那位姑娘一样稳的,可干过这些粗活之后却再也回不到从前了。
等把这波龟卖完,只留下金哥。以后每天睡到自然醒,下楼喂喂蜥蜴,上院子里逗逗金哥。无聊了就上细胞间随便测测序,找到一些有意思的基因位点,敲入一个新基因或者把原基因敲出,得到长得更加花里胡哨的物种。在这个时候,他就是上帝!
他边想边举起手,幻想自己正拿着微针把混合着RNP的淡红色缓冲液注入到蜥蜴肚子里圆圆滑滑的卵母细胞中。
在他看来,微针是世界上最帅的东西。
因为那是上帝的手术刀。
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[1]RNP:核糖核蛋白复合物。是向导RNA和Cas蛋白的复合体,向导RNA可以找到要剪的基因片段的位置,Cas蛋白可以把DNA剪断。
[2]腺病毒:一种无外套膜的双链DNA病毒,有很高的基因包装能力,常作为基因编辑载体。
[3]CRISPR:成簇的规律间隔的短回文重复序列。将它配合上相关的核酸内切酶(简称Cas)就可以切割DNA。CRISPR-CAS技术与锌指核酸酶技术、“神话”核酸酶(TALEN)技术并称基因编辑三大“剪刀”。
[4]脱靶:CRISPR-CAS的识别序列通常是20个左右碱基对,相对于生物的DNA很短,这种短碱基片段在DNA长链中随处可见。所以用它剪切DNA的时候,可能也同时剪掉了非靶标位点,造成各种乱七八糟的突变,导致细胞死亡。
其次,CRISPR-CAS对错误的容忍度比较高,即便某一段碱基片段与靶标片段不完全一致,也能发挥剪切作用,造成脱靶。总之,只要是剪错了地方,就叫做脱靶。
再者,CAS发挥作用时,需要靶标基因的上游存在一个特定的短的碱基序列,称之为PAM序列(对于最广泛使用的CRISPR-CAS9,一般为NGG,其中N为任意一种碱基)。如果实际操作中靶标基因片段上游到处都没有PAM序列,则CRISPR-CAS系统无法发挥剪切作用。这种情况也可以叫做脱靶。
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